TÉCNICAS HISTOLÓGICAS E INMUNOHISTOQUÍMICAS. FUNDAMENTOS Y APLICACIONES

Contenidos mínimos: Fundamentos de Microscopía óptica. Técnicas histológicas: principios teóricos de la fijación de tejidos. Procedimiento para la fijación por inmersión. Técnicas de deshidratación e inclusión. Preparación de bloques y tallado. Micrótomos. Realización de cortes. Coloraciones: principios teóricos y metodología general. Análisis e interpretación de imágenes. Inmunohistoquímica. Fundamentos, especificidad y sensibilidad de las técnicas. Anticuerpos monoclonales y policlonales. Inmunohistoquímica para microscopía óptica: técnicas directa e indirecta. Inmunofluorescencia: fundamento y aplicaciones. Detección de proteínas diana por Western-blot. Microscopia Electrónica. Conceptos de Microscopía electrónica. Comparación de microscopía electrónica y microscopía óptica. Microscopio Electrónico de transmisión (MET) y de barrido (MEB). Preparación de muestras para Microscopía electrónica. Microscopía electrónica en Biología-Fisiología: Determinación morfológica-ultraestructural. Análisis de microfotografías al MET contenidas en publicaciones científicas. Clases teóricas 1- Fundamentos de microscopía óptica. Procesamiento de muestras histológicas para microscopía óptica. 2- Coloraciones histológicas e histoquímicas. Fundamentos generales. 3- Anticuerpos en inmunohistoquímica. Inmunofluorescencia, fundamentos y aplicaciones. 4- Inmunohistoquímica directa e indirecta. Fundamentos y aplicaciones. 5- Métodos inmunológicos aplicados a la detección de proteínas diana: Western blot. 6- Introducción a la microscopía electrónica. 7- Procesamiento de muestras para microscopía electrónica. Clases Prácticas: Práctico I: Inclusión. Cortes aislados y seriados. Montaje de los preparados. Práctico II: de Ig A+ por inmunofluorescencia. Práctico V: Identificación de proteínas asociadas al transporte de Ca2+ por inmunohistoquímica indirecta. Páctico VI: Detección identificación de osteopontina en leche mediante Western blot Práctico VII: Microscopía electrónica de transmisión (MET) y de barrido (MEB): fundamentos y usos. Práctico VIII: Análisis de microfotografías al MET y MEB.